Journal or Publication Title:

«Կաճառ» Գիտական հոդվածների ժողովածու. ՀՀ ԳԱԱ Գիտակրթական միջազգային կենտրոն = ״Качар״ Сборник научных трудов. НАН РА Международный научно-образовательный центр =“Katchar” Collection of Scientific Articles. International Scientific-Educational Center NAS RA

Date of publication:

2022

Number:

2

ISSN:

2579-2903

Official URL:

click here to follow the link

Additional Information:

Սիմոնյան Ռուզաննա, Սիմոնյան Կարեն, Սիմոնյան Գեղամ, Մարմարյան Գայանե, Իսոյան Արմինե, Դարբինյան Լիլիթ, Սիմոնյան Մաքսիմ, Симонян Рузанна, Симонян Карен, Симонян Гегам, Мармарян Гаяне, Исоян Армине, Дарбинян Лилит, Симонян Максим

Other title:

NADPH պարունակող լիպոպրոտեինի և Fe (III)-ի միջև ջերմակայուն սուպերօքսիդ արտադրող համալիր կովի եռացրած կաթից։ Իմունային բջիջների in vitro NADPH օքսիդազի ակտիվացում NADPH պարունակող լիպոպրոտեինով ; Термостабильный супероксид-продуцирующий комплекс NADPH содержащего липопротеина (НЛП) с Fe (III) из кипяченного молока коровы: in vitro активирование этим НЛП изоформ NADPH оксидазы иммунных клеток

Corporate Creators:

H. Buniatian Institute of Biochemistry of NAS RA ; Orbeli Institute of Physiology of NAS RA ; Armenian National Agrarian University

Coverage:

161-172

Abstract:

О2−-producing complexes or associates have recently been isolated from blood serum, goat milk, erythrocyte, leukocyte membranes, and medicinal plant membranes. Fe(III) ions in these complexes act as bridges for electron transfer from NADPH-containing lipoprotein (NCL) to molecular oxygen, reducing it up to О2−. On the other hand, NADPH oxidase (Nox) of erythrocytes and leukocytosis are activated by NCL in vitro. In fact, both serum and milk contain NCL. The main systems for the production of О2− in mammalian milk and blood, as previously stated, are polymorphonuclear leukocytes, as well as О2−-producing complex between NCL and Fe (III). At the same time, Fe(III) ions can be found in milk, and anemia can result from a Fe(III) deficiency in milk. The superoxide (О2−) - producing thermostable complex between NCL and Fe(III): NCL-Fe(III) was isolated and purified from raw and boiled cow milk, for the first time. The specific О2−-producing activity of NCL-Fe(III) complex from milk, before and after boiling, practically does not change as a result of milk boiling (this activity decreases by only 7-8%). After incubating an aqueous mixture of NCL (5 mg/ml) with an aqueous solution of Nox1 + Nox2 (erythrocytes or leukocytes membranes) isoforms, 5 mg/ml, at 37°C for 40 minutes, an ion exchange chromatography was performed on the column of DE cellulose, equilibrated by water at pH9.5. The hNCL-Nox associate eluates from this column with water at pH9.5 The specific О2−-producing activity of hNCL-Nox isoforms of EM and LM basically does not decrease when compared to the NCL-Fe(III) complex. This is a promising finding, suggesting that milk NCL has stimulating the Nox from erythrocytes or leukocyte membranes in vitro does not decrease even after boiling. In contrast to these О2−-producing associates or complexes, NCL isolated from them, suppresses the oxidation of adrenaline to adrenochrome, exerting a reducing-antioxidant effect due to NADPH electrons in its composition (the Cu, Zn-SOD does not inhibit this process). The NCL isolated from this complex, at the expense of NADPH, has a reductive (antioxidant) influence and forms a hybrid О2−-producing associate with isoforms of the NADPH oxidase from erythrocytes and leukocytes membranes. Thus the properties of the thermostable complex NCL-Fe(III): О2−-producing activity, as well as the reductive (antioxidant) activity of NCL, are practically preserved after milk boiling during 10-12 min.
Արյան շիճուկից, այծի կաթից, էրիթրոցիտների և լեյկոցիտների թաղանթներից և դեղաբույսերի թաղանթներից մեկուսացվել են О2−-արտադրող կոմպլեքսներ կամ ասոցիատներ: Այս կոմպլեքսներում Fe(III) իոնները միջնորդներ են NADPH պարունակող լիպոպրոտեինից մոլեկուլային թթվածնին էլեկտրոնների փոխանցման գործընթացում՝ նվազեցնելով այն մինչև О2: Մյուս կողմից, in vitro պայմաններում NADPH օքսիդազը (Nox) ակտիվանում է էրիթրոցիտների և լեյկոցիտների NADPH պարունակող լիպոպրոտեինով: Փաստորեն, և՛ շիճուկը, և՛ կաթը պարունակում են NADPH պարունակող լիպոպրոտեին: Կաթնասունների կաթում և արյան մեջ О2-ի արտադրության հիմնական համակարգերը պոլիմորֆոնուկլեար լեյկոցիտներն են, ինչպես նաև NADPH պարունակող լիպոպրոտեինի և Fe-ի (III) միջև О2-արտադրող համալիրը։ Միևնույն ժամանակ, Fe (III) իոնները կարող են հայտնաբերվել կաթում և Fe (III) անբավարարությունից կարող է առաջանալ սակավարյունություն: Կովի եռացրած կաթից առանձնացվել և մաքրվել է սուպերօքսիդի (О2) կոլոիդային լուծույթ (ակտիվությունը նվազում է մինչև 7-8 %), որը NADPH պարունակող լիպոպրոտեինի և Fe (III)-ի միջև առաջացող համալիր է: NADPH պարունակող լիպոպրոտեինի (5 մգ/մլ) ջրային խառնուրդի ինկուբացիայի արդյունքում Nox1 + Nox2 (էրիթրոցիտների և լեյկոցիտների թաղանթներից) իզոձևերի ջրային լուծույթով (5 մգ/մլ 37°C-ում, 40 րոպե), իոնափոխանակային քրոմատոգրաֆիան իրականացվել է ցելյուլոզային 52 DE-ով առանձին սյուների վրա և հավասարակշռվել է ջրով (pH9.5): NADPH պարունակող լիպոպրոտեին -Nox հիբրիդային միավորը չի մնում այս դիրքում և զտվում է ջրով՝ pH 9,5 պայմաններում։ Այդ համալիրը, ինչպես նաև լիպոպրոտեին ունեն բարձր ջերմա-կայունություն` գործնականորեն պահպանելով օպտիկական սպեկտրային պարամետրերը և ակտիվությունը ինկուբացիայից 10-15 րոպե հետո:
О2−- продуцирующие ассоциаты или комплексы были выделены из сыворотки крови, из молока коз, из эритроцитарных и лейкоцитарных мембран и из мембран лекарственных растений. Как известно, основными системами продуцирования О2− в молоке и крови млекопитающих являются полиморфонуклеарные лейкоциты, а также О2−-продуцирующий комплекс между NADPH содержащего липопротеина (НЛП) и Fe(III). При этом ионы Fe(III) присутствует и в молоке, а при дефиците Fe(III) в молоке наблюдается анемия. Из кипяченого молока коровы выделили и очистили колоидный раствор супероксид (О2−) – продуцирующего комплекса между NADPH содержащим липопротеином и Fe(III). Этот комплекс, а также НЛП имеют высокую термостабильность, практически сохраняя оптические спектральные показатели и активность после инкубации в течение 10-15 мин.

Publisher:

ՀՀ ԳԱԱ

Format:

pdf

Identifier:

click here to follow the link ; oai:arar.sci.am:325595

Language:

en

Location of original object:

ՀՀ ԳԱԱ Հիմնարար գիտական գրադարան